miR-331-3p靶向NRP2抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移以及侵袭
1.重庆市九龙坡区人民医院(401329);2.重庆医科大学附属第一医院
The inhibition of proliferation, migration and invasion of cervical cancer cells by miR-331-3p targeting NRP2
1.Jiulongpo District People's Hospital, Chongqing, 401329;2.The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University
摘要 探讨miR-331-3p靶向神经纤毛蛋白-2(NRP2)对宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移以及侵袭的调控作用。方法:将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic NC组、miR-331-3p mimic组、siRNA NC 组、si-NRP2组、miR-331-3p mimic+NRP2组,其中mimic NC组和miR-331-3p mimic组分别转染mimic NC和miR-331-3p mimic质粒;siRNA NC组和si-NRP2组分别转染siRNA NC和si-NRP2;miR-331-3p mimic+NRP2组转染miR-331-3p mimic和NRP2过表达质粒;对照组不转染。采用Targetscan软件预测靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-331-3p和NRP2靶向关系,qRT-PCR检测miR-331-3p和NRP2的表达。通过CCK-8、细胞划痕和Transwell检测转染后各组的细胞增殖、迁移和侵袭水平。Western blot检测NRP2、PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果:与人正常宫颈上皮细胞相比,宫颈癌HeLa细胞中miR-331-3p表达下调,NRP2升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-331-3p直接靶向作用于NRP2。与对照组和mimic NC组相比,过表达miR-331-3p组miR-331-3p表达升高,NRP2 mRNA和蛋白降低(P<0.05)。过表达miR-331-3p或抑制NRP2的表达均可抑制细胞生长速度,减少侵袭细胞数目,增加划痕宽度;Western blot 检测结果显示过表达miR-331-3p或抑制NRP2的表达均可抑制PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达(均P<0.05),且过表达NRP2可部分逆转miR-331-3p对细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论:miR-331-3p靶向NRP2抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移以及侵袭。
关键词 :
宫颈癌 ,
微小蛋白-331-3p ,
神经纤毛蛋白-2 ,
增殖 ,
迁移 ,
侵袭
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