长链非编码RNASNHG5在卵巢癌组织中表达及对卵巢癌细胞自噬影响
上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院(202150)
Expression of long non-coding RNA SNHG5 in ovarian cancer tissues and its effect on autophagy of ovarian cancer cells
Chongming Branch, Xinhua Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai, 202150
摘要 观察卵巢癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)核仁小RNA宿主基因5(SNHG5)的表达,并分析SNHG5表达对卵巢癌细胞自噬的影响。方法:选取2018年8月—2019年3月本院卵巢癌手术取得的卵巢癌组织73例(卵巢癌组),卵巢囊肿手术取得卵巢组织82例(囊肿组),实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测两组组织中SNHG5表达并分析与卵巢癌患者临床病理关系。培养人卵巢癌细胞SKOV3作为对照组,应用Lipofectamine 2000试剂将转染空质粒pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1-SNHG5重组质粒的SKOV3细胞分别作为阴性对照组、SNHG5过表达组。细胞计数试剂盒(CCK8)法检测各组SKOV3细胞增殖情况,通过透视电镜、单丹(磺)酰戊二胺(MDC)法检测各组SKOV3细胞自噬水平,应用免疫印迹法(WB)检测LC3-I、LC3-II、Beclin 1蛋白表达水平。结果:lnc RNASNHG5相对表达量卵巢癌组(0.49±0.06)低于囊肿组(1.13±0.23),且卵巢癌组组织学分级G3、FIGO分期III~IV期中lnc RNASNHG5低表达者占比更高(P<0.05);SNHG5相对表达量SNHG5过表达组(1.97±0.37)高于空白组(1.03±0.20)和阴性对照组(1.05±0.21)(P<0.05);转染48h、72h、96h时SKOV3细胞增殖抑制率SNHG5过表达组(23.64±4.73%、43.57±8.71%、57.82±11.56%)高于空白组和阴性对照组(P<0.05);与空白组和阴性对照组比较, MDC阳性细胞占比SNHG5过表达组(42.38±7.64)最高,LC3-I蛋白表达量(0.16±0.03)降低,LC3-II(0.86±0.18)、beclin 1(0.97±0.18)升高(均P<0.05)。结论:lncRNA-SNHG5在卵巢癌组织中低表达,lncRNA-SNHG5过表达可明显抑制人卵巢癌细胞活力,促进细胞自噬。
关键词 :
卵巢癌;长链非编码RNA;核仁小RNA宿主基因5;自噬;微管相关蛋白轻链3-&beta